บัฟเฟอร์นี้ใช้ในการศึกษาการเคลื่อนที่ของดีเอ็นเอ
บัฟเฟอร์นี้มีกำลังไอออนิกต่ำและมีความสามารถในการเก็บบัฟเฟอร์ต่ำ เหมาะที่สุดสำหรับการอิเล็กโตรโฟเรซิสของดีเอ็นเอขนาดใหญ่ (> 20 กิโลไบต์) และจะต้องมีการเปลี่ยนใหม่บ่อยครั้งหรือหมุนเวียนเพื่อให้สามารถใช้งานเจลได้นานขึ้น (> 4 ชั่วโมง)
ด้วยเหตุนี้คุณอาจต้องการพิจารณาหลายบัฟเฟอร์ของบัฟเฟอร์
ระบุว่าบัฟเฟอร์ทำได้ง่ายและขั้นตอนสามารถดำเนินการได้อย่างรวดเร็วทำให้มากกว่าหนึ่งชุดในแต่ละครั้งไม่ควรใช้เวลานานหรือยากที่จะดึงออก การใช้คำแนะนำด้านล่างนี้จะใช้เวลาเพียง 30 นาทีในการสร้างบัฟเฟอร์ TAE นี่คือวิธี:
เตรียมโซลูชันสต็อคของ EDTA
เตรียมสารละลาย EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) ก่อนเวลา EDTA จะไม่เข้าสู่สารละลายจน pH ถูกปรับประมาณ 8.0 สำหรับสารละลายสต็อก 0.5 มิลลิลิตร EDTA ที่มีปริมาตร 500 มิลลิลิตรให้ใช้ EDTA disodium salt 93.05 กรัม (FW = 372.2) ละลายในน้ำปราศจากไอออนขนาด 400 มิลลิลิตรและปรับ pH ด้วย sodium hydroxide (NaOH) เติมสารละลายให้เป็นปริมาตรขั้นสุดท้าย 500 มิลลิลิตร
แส้ขึ้นหุ้น Solution ของ TAE
ทำเป็นสารละลาย TAE เข้มข้น (50x) โดยชั่งน้ำหนัก 242 กรัมของ Tris base (FW = 121.14) และละลายในน้ำ deionized ประมาณ 750 มิลลิลิตร
ใส่กรดแลคติค 57.1 มิลลิลิตรและ 100 มิลลิลิตร 0.5 M EDTA (pH 8.0) หลังจากนั้นให้ปรับสารละลายให้เป็นปริมาตรขั้นสุดท้าย 1 ลิตร สารละลายสต็อกนี้สามารถเก็บรักษาได้ที่อุณหภูมิห้อง ค่าความเป็นกรด - ด่างของบัฟเฟอร์นี้ไม่ได้ปรับและควรเป็นประมาณ 8.5
เตรียมโซลูชันการทำงานของ TAE
วิธีแก้ปัญหาการทำงานของบัฟเฟอร์ TAE แบบ 1x ทำได้โดยการเจือจางสารละลายสต็อกด้วยน้ำ deionized 50 เท่า
ความเข้มข้นของตัวทำละลายขั้นสุดท้ายคือ 40 mM Tris-acetate และ 1 mM EDTA ขณะนี้บัฟเฟอร์พร้อมสำหรับใช้เจล agarose แล้ว
สิ่งที่คุณต้องการสำหรับบัฟเฟอร์
เนื่องจากการทำบัฟเฟอร์ TAE จำเป็นต้องใช้ชุดคำสั่งที่ง่ายและรวดเร็วจำนวนวัสดุที่จำเป็นต้องใช้ไม่มากนัก คุณจำเป็นต้องใช้ EDTA เกลือโซเดียมฐาน Tris และกรดอะซิติกน้ำแข็ง
การทำบัฟเฟอร์ต้องใช้เครื่องวัดค่า pH และมาตรฐานการสอบเทียบตามความเหมาะสม นอกจากนี้คุณยังต้องใช้ 600 มิลลิลิตรและ 1500 มิลลิลิตรบีกเกอร์หรือขวดรวมทั้งกระบอกสูบที่สำเร็จการศึกษา สุดท้ายคุณจะต้องน้ำ deionized, กวนบาร์และแผ่นกวน
ห่อ
คุณวางแผนที่จะทำบัฟเฟอร์ที่ใดในไซต์สถานที่ทำงานหรือสถานที่อื่นเช่นที่บ้านของคุณหรือไม่? ตรวจสอบพื้นที่โฆษณาก่อนที่คุณจะเริ่มตรวจสอบว่ามีวัสดุทั้งหมดสำหรับ TAE buffer
หากคุณไม่ต้องการจ่ายค่าวัสดุให้เลือกใช้บัฟเฟอร์นอกบ้านของคุณ คุณสามารถสั่งซื้อวัสดุที่คุณต้องการได้แบบออนไลน์หรือไปที่ร้านพิเศษสำหรับพวกเขา