นอกจากนี้ยังเรียกว่าการวิเคราะห์ RFLP เทคนิคนี้ใช้ประโยชน์จากความ หลากหลาย ในรหัสพันธุกรรมของแต่ละบุคคล แม้ว่าสมาชิกทุกคนของเผ่าพันธุ์จะมีองค์ประกอบทางพันธุกรรมเหมือนกัน แต่ความแตกต่างเล็กน้อยเหล่านี้จะอธิบายถึงรูปแบบของฟีโนไทป์เช่นลักษณะหรือการเผาผลาญอาหารระหว่างแต่ละบุคคล
RFLP: เทคนิคการวิเคราะห์และการประยุกต์ใช้
เทคนิคการวิเคราะห์ RFLP เกี่ยวข้องกับการตัดภูมิภาคโดยเฉพาะของ ดีเอ็นเอ ด้วยความแปรปรวนที่รู้จักกันโดยใช้เอนไซม์ที่ จำกัด แล้วแยกชิ้นส่วนดีเอ็นเอโดยใช้ agarose gel electrophoresis และกำหนดจำนวนชิ้นส่วนและขนาดสัมพัทธ์
เอนไซม์ที่ จำกัด คือเอนไซม์ซึ่งเป็นโมเลกุลโปรตีนที่ตัดดีเอ็นเอในบริเวณที่ จำกัด ในสาระสำคัญตัวอย่างดีเอ็นเอถูกทำลายและย่อยด้วยเอนไซม์ที่ จำกัด เศษที่เกิดขึ้นจะถูกแยกออกตามความยาวของพวกเขาและรูปแบบของขนาดชิ้นส่วนจะแตกต่างกันไปสำหรับแต่ละการทดสอบ
กระบวนการ RFLP แบบเต็มรูปแบบต้องมีการติดฉลากการตรวจสอบการกระจายตัวของดีเอ็นเอการอิเล็กโทรฟิเรสซิสการบวมการผสมพันธุ์การซักผ้าและการ autoradiography RFLP ที่ตรวจพบจะถูกมองเห็นโดยใช้ฟิล์มเอ็กซ์เรย์ในการ autoradiography ซึ่งสามารถตรวจดูและวิเคราะห์ชิ้นส่วนดีเอ็นเอหลังจากที่แยกออกจากกันโดยการอิเล็กโตรโฟเรซิส
บางส่วนของโปรแกรมประยุกต์สำหรับการวิเคราะห์ RFLP รวมถึง:
- DNA fingerprinting นักวิทยาศาสตร์ทางนิติวิทยาศาสตร์อาจใช้การวิเคราะห์ RFLP เพื่อระบุผู้ต้องสงสัยตามตัวอย่างหลักฐานที่รวบรวมได้ในฉากอาชญากรรม
- ความเป็นพ่อ RFLP ใช้ในการกำหนดความเป็นบิดาหรือการตรวจสอบบรรพบุรุษ
- ความหลากหลายทางพันธุกรรม เทคนิคนี้สามารถนำมาใช้ในการศึกษาวิวัฒนาการและการอพยพของสัตว์ป่าศึกษารูปแบบการผสมพันธุ์ของประชากรสัตว์และในการตรวจหาและวินิจฉัยโรคบางชนิด
เทคนิคการใช้การตรวจหาความแปรผันของจีโนมของ RFLP เป็นเครื่องมือสำคัญในการทำแผนที่จีโนมและการวิเคราะห์โรคทางพันธุกรรม ถ้าตำแหน่งของยีนของโรคเฉพาะกำลังถูกค้นพบในโครโมโซมบางชนิดนักวิจัยจะวิเคราะห์ DNA ของสมาชิกในครอบครัวที่มีโรคแล้วหารูปแบบการถ่ายทอดทางพันธุกรรมที่คล้ายกันในอัลลีล RFLP
เมื่อยีนของโรคถูกแปลเป็นภาษาท้องถิ่นแล้วการวิเคราะห์ RFLP ต่อสมาชิกในครอบครัวอื่น ๆ จะสามารถเปิดเผยยีนของยีนที่กลายพันธุ์หรือแสดงถึงความเสี่ยงต่อโรคโดยรวม เป็นสิ่งสำคัญที่ต้องทราบว่าเทคนิค RFLP ไม่ได้ใช้กันอย่างแพร่หลายในขณะนี้ซึ่งมีเทคนิคใหม่ ๆ ที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นสำหรับการวิเคราะห์ดีเอ็นเอในด้านนิติวิทยาศาสตร์และสาขาอื่น ๆ
ด้านลบของการวิเคราะห์
น่าเสียดายที่เทคนิคการวิเคราะห์ RFLP น่าเบื่อและช้า นอกเหนือจากการต้องการตัวอย่างดีเอ็นเอจำนวนมาก - ตัวอย่างจะต้องมีขนาดประมาณหนึ่งในสี่ซึ่งมีขนาดใหญ่มากสำหรับตัวอย่างดีเอ็นเอ - กระบวนการจากการติดฉลากการสอบสวนการซักผ้าและ autoradiography อาจใช้เวลาถึง เต็มเดือนให้เสร็จสมบูรณ์
ผลจากโครงการจีโนมมนุษย์ได้เปลี่ยนความต้องการ RFLP เป็นจำนวนมาก โครงการอนุญาตให้มีการกำหนดลำดับ DNA ทั้งหมดที่พบได้ในเซลล์มนุษย์จีโนมของมนุษย์และเพื่อระบุยีนทั้งหมดในจีโนมของมนุษย์